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如何进行熊猫体育官网冻存?步骤是什么?

2017-07-15

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  熊猫体育官网冻存就是通过冷冻等技术把身体熊猫体育官网保存起来,以备未来不时之需,那么如何进行熊猫体育官网冻存?有哪些步骤呢?

  下面熊猫体育生物小编给大家总结8步。

  1、配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;

  2、取对数生长期的熊猫体育官网,去除旧培养液,用PBS清洗。

  3、去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的熊猫体育官网消化下来;

  4、离心1000rpm,5min;

如何进行熊猫体育官网冻存?步骤是什么?

  5、去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使熊猫体育官网均匀,计数,调节冻存液中熊猫体育官网的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;

  6、熊猫体育官网分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;

  7、在冻存管上标明熊猫体育官网的名称,冻存时间及操作者;

  8、冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有熊猫体育官网的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。



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