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2021-11-09
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2021年11月6日迎来了盛大的北京初雪，一夜之间凛冬已至，冻手冻脚的温度下，不少客户又双叒叕向我们抛出这个“灵魂拷问”——“你们的采样管扛冻不？”
熊猫体育研发部的同事听闻后邪魅一笑，眼里带着两分讥笑，三分凉�。姆致痪�，反手就是一套实验操作，这就向大家验证，熊猫体育非灭活型病毒采样管在经历低温受冻运输过程后其性能是否有显著变化。
一、实验目的
验证本公司病毒采样管产品（货号MT-0301）在经历低温冻上之后，再复温融化，对其使用性能没有显著的影响。
二、实验方案
模拟运输过程中低温受冻的过程，把采样管置于低温环境中24小时后，在室温环境下融化。对照采用正常存放未经冻融的采样管产品。各组均加入病毒混合液，于4℃条件下保存24小时，然后56℃水浴30分钟，进行核酸提取及核酸检测。每组设置2个重复。
1、 低温结冰模拟：设置两个低温梯度，分别把采样管放置于-20℃和-80℃两个低温环境中。
2、 病毒液混合：采用2种不同浓度的病毒液，分别代表高、低两个浓度梯度。病毒液的拷贝数分别为106copies/mL和104copies/mL。模拟实际采样过程，将病毒液以1：10的体积比加入至采样液中，病毒液100μL，采样液1mL，并向其中加入100μL的口腔采集液。采用涡旋振荡器充分混合。
3、 各组混合完成后，置于4℃环境中24小时，并于56℃水浴中灭活30分钟。
4、 提取各组病毒的核酸，并采用RT-qPCR的方法检测各组的病毒含量。以Ct值大小作为结果评价的依据。CT值越小说明检测出的浓度越高。
5、 实验组别如下：
每组设置2个重复。
三、主要实验材料
采样液：熊猫体育MT-0301产品采样液。
病毒稀释液：采用熊猫体育生物的病毒分离培养基进行梯度稀释。
验证用的病毒：猪流行性腹泻病毒。其结构和基因组大小均与新型冠状病毒相似。
核酸提取试剂：熊猫体育免裂解核酸提取试剂（磁珠法）
四、实验结果
1、 产品外观
颜色一致，无沉淀析出。
2、 性能评价结果
扩增曲线
a.各实验组与阴性对照组扩增曲线
起峰较早的几组为高浓度组别的扩增曲线，较晚起峰的几组为低浓度组别的扩增曲线。
b.各组Ct值结果统计
病毒高浓度与病毒低浓度各组间Ct值没有显著差别。
五、 实验结论
熊猫体育生物非灭活病毒采样管产品经过一次冻融，不会影响其使用性能，完全能够满足病毒样本低温运输与低温保存的要求。
