上期文章我们展示了使用熊猫体育纯因子无血清培养基培养出的NK熊猫体育官网的脱颗粒能力，NK熊猫体育官网脱颗粒能力可以用CD107a的表达来检测。实验结果表明，在不同的效靶比下，CD107a均能够正常表达。随着NK与K562熊猫体育官网孵育时间的延长，CD107a的表达量有明显上调。

样本一：孵育2h

样本二：孵育4h

本期我们通过LDH法检测NK熊猫体育官网的杀伤能力。熊猫体育官网的胞浆内含有LDH，正常情况下LDH不能透过熊猫体育官网膜，当熊猫体育官网受到NK熊猫体育官网的杀伤后，LDH释放到熊猫体育官网外。LDH 可使乳酸锂脱氢，进而使NAD+还原成NADH，后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原碘硝基氯化四氮唑（INT），INT 接受H＋被还原成紫红色甲月赞类化合物，在酶标仪上用490nm比色测定。其反应原理如下：

检测步骤

1. 靶熊猫体育官网K562的准备：实验前24h将靶熊猫体育官网进行传代培养，应用前用无血清培养基清洗1次，用无血清培养基调整熊猫体育官网密度并接种于孔板。

2. 效应熊猫体育官网的准备：应用前用无血清培养基清洗1次，用无血清培养基调整熊猫体育官网密度。

3. NK熊猫体育官网活性检测：取靶熊猫体育官网和效应熊猫体育官网按不同效靶比进行接种，加入U型96孔培养板中，于37度，5%CO2培养箱中孵育4小时。随后将熊猫体育官网在孔板中400g离心5min。LDH释放剂的添加为原体积的10%，加入释放剂后反复吹打熊猫体育官网。

4. 分别取各孔上清液120ul，加入到新的96孔平底板种，每孔加入LDH检测工作液。

5. 混匀，室温25℃避光孵育30min。然后在490nm处测定吸光度。可使用600nm或大于600nm的任意波长作为参考波长进行双波长测定。

NK熊猫体育官网活性（%）=[（反应孔OD-自然释放孔OD）/（最大释放孔OD-自然释放孔OD)]*100%

检测结果

检测结论

经LDH法检测可知，熊猫体育纯因子无血清培养基培养出的NK熊猫体育官网对K562熊猫体育官网有正常的杀伤能力。